Cre工具鼠是一种基因敲除小鼠，可以通过Cre重组酶系统实现特定基因的敲除，在条件性靶基因功效研究、疾病模型研究等方面发挥着极大作用。而荧光陈诉Cre工具鼠作为Cre工具鼠的好搭档，又有哪些用途呢？og视讯官网注册平台带你一探究竟。

什么是荧光陈诉Cre工具鼠？

利用基因工程技术手段，将“loxP-STOP-loxP (LSL)-Reporter gene”插入到小鼠基因组内，这样构建的小鼠模型就称为Cre陈诉工具鼠^[1]。常见的陈诉基因包罗β-半乳糖苷酶（lacZ）陈诉基因、荧光素酶（luciferase）陈诉基因和荧光陈诉基因，以荧光卵白作为陈诉基因的小鼠就称为荧光陈诉Cre工具鼠。常用的荧光陈诉基因包罗绿色荧光卵白EGFP/ZsGreen，黄色荧光卵白EYFP，青色荧光卵白ECFP，红色荧光卵白mCherry/tdTomato等^[2]。

图1. Cre陈诉工具鼠战略图^[1]

当荧光陈诉工具鼠与Cre工具鼠杂交，双阳性子代通过Cre介导的重组使得陈诉基因在特定细胞类群中启动表达，从而实现了细胞荧光标志和谱系追踪^[3]，还可用于监测重组酶的活性和表达规模^[4]。荧光陈诉系统已被用于检测基因编辑效果，Alapati等人使用Rosa26-mT/mG双荧光陈诉小鼠证明在胎儿发育历程中CRISPR-Cas9基因编辑试剂在子宫内的精确定时递送会导致胎儿肺中靶向和特异性基因编辑^[5]。

除此之外，Cre常与Dre工具鼠联用进行谱系追踪[6]，纪录肝脏中的细胞增殖^[7]，追踪癌症转移和纤维化中的EMT^[8]，并分析心脏干细胞在心脏修复历程中的作用^[9]。

荧光陈诉Cre工具鼠模型优势

1.自发荧光，非酶促反映

相较于荧光素酶和β-半乳糖苷酶，荧光卵白自发荧光无需添加底物，成像简朴。

2.颜色多用

有差异颜色的荧光卵白或卵白变体可供选择，同时显示多种细胞类型。

3.定量分析

使用荧光显微镜或流式细胞术可定量分析荧光的相对表达强度。

图2. R26R-Confetti小鼠：随机多色的Cre荧光陈诉鼠^[3]

og视讯官网注册平台荧光陈诉Cre工具鼠品系

1.红色荧光陈诉工具鼠 T058417 H11-CAG-LSL-tdTomato

本品系在全身表达的CAG启动子后连接一个带有LSL序列的tdTomato，并将其敲入小鼠11号染色体的H11宁静位点。当Cre重组酶存在时，由于loxP重组，小鼠基因组中的STOP被删除，tdTomato被表达并在光源引发下发出耀眼的红色荧光。

图3. H11-CAG-LSL-tdTomato模型战略示意图

部门验证数据展示：

图4. H11-CAG-LSL-tdTomato模型荧光成像检测

Cre-：H11-CAG-LSL-tdTomato单阳性小鼠；

Cre+：Rosa26-EIIA-iCre,

H11-CAG-LSL-tdTomato 双阳性小鼠

2.绿色荧光陈诉工具鼠 T057823 Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA

本品系在全身表达的CAG启动子后连接一个带有LSL序列的EGFP，并将其敲入小鼠6号染色体的Rosa26宁静位点。当Cre重组酶存在时，由于loxP重组，小鼠基因组中的STOP被移除，EGFP基因表达被激活，发生绿色荧光卵白。

图5. Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA模型战略示意图

部门验证数据展示：

图6. Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA模型荧光成像检测

Cre-：Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA单阳性小鼠；

Cre+：TgTn(pb-CAG-iCre)，Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA 双阳性小鼠

3.双色荧光陈诉工具鼠 T006163 H11-CAG-LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato (B6-G/R)

本品系在全身表达的CAG启动子后连接一个双荧光陈诉基因ZsGreen和tdTomato，并将其敲入小鼠 11号染色体的H11宁静位点。当Cre重组酶存在时，由于loxP重组，小鼠基因组中的ZsGreen和STOP被移除，小鼠将由全身泛绿变色成特定组织的红光。

图7. B6-G/R模型战略示意图

部门验证数据展示：

图8. CAG-G/R模型荧光成像检测

Cre-：B6-G/R单阳性小鼠；

Cre+：Rosa26-EIIA-iCre，B6-G/R 双阳性小鼠

图9. B6-G/R模型流式细胞术分析

Cre-：B6-G/R单阳性小鼠，

Cre+：H11-Cd4-iCre，B6-G/R双阳性小鼠

相关品系：

除了上述3种荧光Cre工具鼠，og视讯官网注册平台还自主研发了多种荧光陈诉工具鼠，拥有200+Cre工具鼠品系，50+陈诉鼠品系，笼罩神经系统、免疫系统等多个研究领域。国际认证的动物设施和严格的质控尺度让研究更无忧，接待咨询了解。

参考文献：

[1]Li, Siang, and Cord Brakebusch. "Reporter Mice for Gene Editing: A Key Tool for Advancing Gene Therapy of Rare Diseases." Cells 13.17 (2024): 1508.

[2]Ghim, Cheol-Min, et al. "The art of reporter proteins in science: past, present and future applications." (2010).

[3]Snippert, Hugo J., et al. "Intestinal crypt homeostasis results from neutral competition between symmetrically dividing Lgr5 stem cells." Cell 143.1 (2010): 134-144.

[4]Bittner-Eddy, Peter D., Lori A. Fischer, and Massimo Costalonga. "Cre-loxP reporter mouse reveals stochastic activity of the Foxp3 promoter." Frontiers in immunology 10 (2019): 2228.

[5]Alapati, D., et al. "In utero gene editing for monogenic lung disease. Sci Transl Med 11." (2019).

[6]Tang, Juan, et al. "Arterial Sca1+ vascular stem cells generate de novo smooth muscle for artery repair and regeneration." Cell stem cell 26.1 (2020): 81-96.

[7]He, Lingjuan, et al. "Proliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repair." Science 371.6532 (2021): eabc4346.

[8]Li, Yan, et al. "Genetic fate mapping of transient cell fate reveals N-cadherin activity and function in tumor metastasis." Developmental cell 54.5 (2020): 593-607.

[9]Li, Yan, et al. "Genetic lineage tracing of nonmyocyte population by dual recombinases." Circulation 138.8 (2018): 793-805.